美国3i 双视图倒置选择性平面照明显微镜
概述
双视图倒置选择性平面照明显微镜(diSPIM)是用光片的方法提供低光毒性,在三维成像中使得能够超出延长时间对活体小生物成像。他是一个灵活的光片系统带一个开放的标本几何形状,不需要特殊的玻片或毛细管。diSPIM对一个标本成像使用两束从两个相当的光学路径发出的垂直光片并且物镜分别依次用于照明和成像。由此产生的三维数据集在X,Y和Z有立方体像素分辨率,只具有两个视图,使在低剂量情况下快速图像抓取,延长标本生存能力。
两个匹配的水浸物镜的数值孔径可达到0.8,工作距离允许有效的正交安装。每个物镜是通过相同的高速度高分辨率sCMOS探测器来激发和发射收集。第三个物镜位于标本腔室下方,用来定位样品。照片处理可以通过第三个物镜来添加,比如Ablate消融系统。
diSPIM可以作为Marianas系统的一个部件,一个已有科研倒置显微镜的附件,或者是作为一个独立的系统。当添加到一个倒置的显微镜,透射光路径被diSPIM总成替代,且显微镜的物镜用于定位样品。
SlideBook 6 软件控制diSPIM显微镜,激光发射和sCMOS探测器,允许所有硬件部件去卷积和查看三维样品图能力时,可以进行错综复杂的高速同步。
核心部件
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科研倒置显微镜 |
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LED光源 |
全电动和自动对焦能力,并且所有现金技术, 提供了全套的物镜和过滤器。 |
高能量6通道LED光源 |
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diSPIM显微镜 |
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激光堆叠和光纤切换器 |
两个振镜扫描垂直光路带匹配的过滤器和物镜。 |
模块化固态激光发射,带不到1毫秒的SDC,TIRF和照片处理切换 |
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XYZ扫描台 |
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计算机 |
全电动标本平台带线性光学编码器和Z轴压电平台 |
Dell专业级工作站,提供速度和大数据集处理 |
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探测器 |
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数字显微镜软件 |
双高速高分辨率sCMOS探测器和另一探测器通过外延路径查找样品 |
SlideBook除了提供分析技术和3D渲染,还通过控制上百种设备,提供了采集功能。 |
图像处理
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Vector |
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Ablate |
衍射极限高速X,Y扫描仪用于以激光为基础的图像处理光源的线性或ROI扫描 |
激光消融系统带532nm脉冲式激光器 |
Lattice LightSheet |
diSPIM |
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XYZ分辨率(nm) |
150 x 230 x 280 (SIM)1 230 x 230 x 370 (Dither) |
330 x 330 x 330 |
光毒性 |
极小 |
非常小 |
典型标本 |
单细胞 |
细胞,组织 |
物镜 N.A. |
1.1 |
0.8 |
1.晶格层光显微镜:在高时空分辨率下对分子到胚胎进行成像。